Restriktionsenzyme

= um DNA in kleine Fragmente zu schneiden nutzt man Restriktionsenzyme, sie sind also die molekularen Grundwerkzeuge der Gentechnik.

Mit Hilfe von ihnen lässt sich rekombinante (neu kombinierte) DNA herstellen.

• kommen natürlicherweise in Bakterien vor
• erkennen spezifische Basenabfolgen, die von vorne nach hinten und hinten nach vorne gleich zu lesen sind = palindromische DNAsequenzen

Restrinktionsenzyme schneiden auf beiden Seiten der Doppelhelix von 5’-3’ und können dabei entweder glatte Enden (blunt ends) oder klebrige Enden (sticky ends) erzeugen.

Entweder kleben die glatten Enden sich wieder zusammen, oder aber sie können sich mit den sticky ends eines anderen Organismus verbinden.

• DNA-Ligasen katalysieren die Verknüpfung von DNA-Fragmenten

Nutzen

Restriktionsenzyme ermöglichen es bestimmte DNAsequenzen gezielt auf ein Bakterium zu übertragen, sodass das gewünschte Gen belieb oft vervielfacht werden kann, sodass dieses zu Therpiezwecken eingesetzt werden kann (= Klonierung als Motiv, rekombinierte DNA herzustellen).

• Übertragung der rekombinanten DNA in eine Wirtszelle (Überträger) über einen sogenannten Vektor.
• Bakterien enthalten Plasmide, kleine DNA-Ringe → lassen sich so modifizieren, dass sie rekombinante DNA in Zellen hineintransportieren

→ auch ein Plasmid enthält mindestens eine Stelle für Restriktionsenzyme