= Polymerase Chain Reaktion → Standardmethode der molekularen Biologie zur Vervielfältigung bestimmter Abschnitte doppelsträngiger DNA

grober Ablauf

1. doppelsträngige DNA (= Template) wird durch Hitze getrennt
2. Polymerase synthetisiert an jedem Einzelstrang einen neuen Tochterstrang

→ Amplifizierung (= exponentielle Vervielfältigung eines bestimmten Abschnittes)

detaillierter Reaktionsablauf

1. Reaktionszyklus

Enthält:

• doppelsträngige Ausgangs-DNA

• vier verschiedene Nukleotide (dATP, dGTP, dCTP, dTTP)

dATP: desoxy Adenosintriphosphat

dCTP: desoxy Cytidintriphosphat

dGTP: desoxy Guanosintriphosphat

dTTP: desoxy Thymidintriphosphat

• DNA-Polymerasen (Taq-Polymerase)

• Primer (Oligonukleotide)

Denaturierung (90°C)

Denaturierung der DNA und Aufteilung in zwei Einzelstränge

Annealing (50 - 60°C)

Senkung der Temperatur, um die Anlagerung der Primer an die komplementären Basenpaare zu fördern

Elongation (70°C)

Erhöhung der Temperatur zur Förderung der DNA-Polymerase

⇒ Anzahl der Kopien: 4, wobei die DNA noch über den gewünschten Abschnitt hinausgeht.

1. Reaktionszyklus